Категории общих буферных солей

В обратно-фазовой хроматографии рН подвижной фазы обычно находится между 2-7. Когда аналит может диссоциировать в условиях обратной фазы или когда рН образца находится за пределами диапазона 2-7,Буферная сольТребуется. Соединения, которые могут диссоциировать в условиях обратной фазы, обычно имеют амино-и карбоксильные группы со значениями pKa между 1-11. Выбор правильного pH буфера может гарантировать, что диссоциированные функциональные группы существуют либо в ионной форме, либо в форме нейтрального соединения. Если рН образца вреден для колонки, то буферный раствор может сделать его более мягким или уменьшить вред. Диапазон допуска pH для обычной колонки на основе диоксида кремния составляет 2-8. Общие буферные соли электролитов классифицируются следующим образом.

1. ЩелочнойБуферные соли

Общие добавки включают аммиак и триэтиламин, оба из которых могут увеличить рН воды до очень высокого уровня, достаточно высокого, чтобы растворить частицы силикагеля. Следовательно, их нужно использовать с осторожностью. Кроме того, эти два растворителя обычно нелегко удалить с помощью методов промывки и обслуживания. Особенно для триэтиламина, даже если он хроматографической чистоты, он может быть загрязнен из-за ухудшения качества после длительного периода хранения.

2. КислотныеБуферные соли

1. Муравьиная кислота: обычно используется при концентрации ниже 1%, она может увеличить pH воды примерно до 2.

2. Уксусная кислота: немножко менее кислая чем муравьиная кислота, обычно используемая на концентрации не превышая 5%, она может увеличить пэ-аш воды к вокруг 2.

3. Трифторуксусная кислота: относительно сильная кислота, обычно используемая на концентрации не превышая 0,5%, она может уменьшить пэ-аш воды к под 2. Она имеет большую интенсивность иона и некоторое влияние пары иона, и часто использована как добавка анализируя протеины и пептиды. Наиболее фатальные проблемы этих трех кислот заключаются в их поглощении ультрафиолетом на низких длинах волн. Обычно не рекомендуется использовать их на длинах волн менее 215 нм. Кроме того, муравьиная кислота, уксусная кислота и трифторуксусная кислота являются летучими, и концентрация этихБуферные соли электролитаМожет меняться со временем.

4. Фосфорная кислота: это нелетучая кислота с хорошей ионной интенсивностью. Самое главное, что нет фонового поглощения в низковолновой УФ-области. Однако он также имеет некоторые недостатки, такие как несовместимость с методами масс-спектрометрии. Кроме того, есть некоторые другие кислоты, такие как серная кислота, соляная кислота или лимонная кислота, но они редки.

3. СольБуферные соли

По сравнению с простыми кислотно-щелочными буферами, регулируя пропорции двух солей в разныхБуферные солиБуферный раствор с определенным pH может быть легко приготовлен, а буферные соли с буферной способностью могут контролировать значение pH подвижной фазы.

1. Форматные соли: обычно используемые формиатные соли в жидкостной хроматографии представляют собой формиат аммония. Этот тип соли обладает хорошей растворимостью, полностью совместим с методами жидкостной масс-спектрометрии и оказывает относительно небольшое влияние на хроматографические колонки. Однако недостатком является то, что интенсивность ионов является относительно низкой. Кроме того, формиатные соли склонны к расплыву, что затрудняет взвешивание и потенциально летучие в подвижной фазе. В сочетании с муравьиной кислотой буферная система муравьиной кислоты-формиата аммония может обеспечить буферную способность в диапазоне рН 3 ~ 4,5, просто регулируя соотношение двух.

2. Ацетатные соли: общие примеры-ацетат аммония. Использование ацетатных солей аналогично формиатным солям, а интенсивность ионов не высока. Уксусная кислота-система буфера ацетата аммония может контролировать пэ-аш в ряде 4 ~ 5,5.

3. Соли фосфата: одно из наиболее обыкновенно используемых решений буфера в ХПЛК под УЛЬТРАФИОЛЕТОВЫМИ условиями обнаружения потому что его можно использовать на длинах волн под 220 нм. Фосфатные соли имеют три значения pKa. Хотя они широко используются, необходимо обратить внимание на проблемы их растворимости, чтобы предотвратить их осаждение в насосах ВЭЖХ или хроматографических колоннах в условиях высокой концентрации.

Обычно используются натриевые и калиевые соли фосфорной кислоты, и способность регулирования pH этих двух очень похожа, с небольшой разницей в интенсивности ионов. В большинстве случаев, они могут быть использованы взаимозаменяемо. Поскольку фосфорная кислота является многоосновной кислотой, она может образовывать моногидрофосфат и дигидрофосфат, поэтому использование фосфатной буферной системы для регулировки pH является более гибким и может охватывать широкий диапазон и может обеспечивать высокую интенсивность ионов. К сожалению, фосфатная буферная система для подвижной фазы не совместима.Le с масс-спектрометрией.