Принципы разработки для выбора буферных солей

Многие методы жидкой фазы используют буферные соли. Было обнаружено, что многие люди не понимают применения буферных солей в жидкофазных методах, поэтому я хотел бы поделиться некоторыми своими взглядами и стимулировать дискуссию.

1. Время нанесения буферных солей

Если образец или основные примеси, которые должны быть изучены в образце, имеют тенденции ионизации, другие конкретные случаи будут обсуждаться отдельно. Среди компонентов с сильными тенденциями ионизации некоторые находятся в молекулярном состоянии и лучше сочетаются с хроматографической стационарной фазой обратной фазы; другие находятся в ионном состоянии и имеют более сильное сродство с подвижной фазой. Если состояние ионизации состояния молекулы и ионного состояния не контролируется с помощью буферных солей, легко получить пиковый хвост и бифуркацию. В этом случае водные и органические системы не должны использоваться в качестве подвижной фазы, и следует выбирать буферные соли и органические системы.

2. Буферная способность и выбор pH буферных солей

При использованииБуферные соли электролитаВ мобильной фазе он должен иметь определенную буферную емкость. Если уменьшение количества впрыскиваемого образца может улучшить форму пика, это может указывать на то, что буферная способность раствора буферной соли недостаточна. Буферная способность раствора буферной соли связана с концентрацией буферной соли и значением pH раствора буферной соли. Чем выше концентрация буферной соли, тем сильнее буферная способность; чем ближе значение pH буферного раствора соли к его pKa, тем сильнее буферная способность. Как правило, значение pH раствора буферной соли должно находиться в диапазоне pKa ± 1. Чтобы обеспечить время удержания основного Компонент не отклоняется значительно должный к небольшим изменениям в значении пэ-аш, значение пэ-аш решения соли буфера должно находиться вне ряда ± пКа образца 2.

3. Длина волны отсечки буферных солей.

Каждая буферная соль имеет соответствующую длину волны среза, и длина волны обнаружения способа не должна быть меньше длины волны среза раствора буферной соли. Чем ближе длина волны обнаружения к длине волны отсечки подвижной фазы, тем выше базовый шум, тем больше погрешность значения отклика и тем меньше значение отклика и чувствительность компонента.

4. Общие идеи для применения буферных солей

1. Концентрация буферной соли обычно составляет 10-50 ммоль/л. Концентрация буферной соли должна быть выбрана в соответствии со свойствами образца и количеством впрыска для удовлетворения требуемой буферной емкости.

2. Максимально допустимая доля органической фазы в градиентном элюировании должна определяться путем экспериментов по смешиванию буферных солей и органических фаз. Для определения максимально допустимой доли органической фазы следует принимать различные пропорции буферной соли-органической фазы, такие как 10:90, 20:80, 30:70 и т. Д. Буферные соли не должны быть установлены в высокой пропорции на инструменте, чтобы предотвратить осаждение буферных солей от повреждения инструмента.

3. Выберите буферные соли в соответствии с несколькими ограничениями, такими как длина волны отсечки, значение pH и буферная способность и т. Д. Например, если длина волны обнаружения находится на конце поглощения, обычно следует выбирать фосфат.

4. Решения соли Коммонбуфер включают: 0,1% решение фосфорной кислоты/трифторуксусной кислоты/уксусной кислоты/муравьиной кислоты, 0,02-0,05 моль/л решение дигидроген фосфата калия (отрегулированное к пэ-аш 3,0 с фосфорной кислотой), етк.

5. Для щелочных соединений предпочтительны соли калия, которые могут лучше подавлять эффект хвоста.