Moderna: Использование буферной системы TRIS для повышения стабильности мРНК

Недавно в Модерне прошел пятый День науки и техники. В отчете компания представила последние достижения в области доставки и стабильности модифицированной мРНК-терапии.

Сама мРНК нестабильна, поэтому улучшение стабильности мРНК имеет большое практическое значение для продления срока хранения и срока годности.

Исследователи Moderna обнаружили в своих исследованиях, что третичный аминный азот ионизируемых липидов в составах LNP может реагировать с мРНК для генерации аддуктов.

Эти аддукты могут вызывать нетранслируемую мРНК, тем самым уменьшая экспрессию белка, кодируемого мРНК.

Поскольку ионизируемые липиды широко присутствуют в составах LNP, механизм снижения экспрессии мРНК может широко применяться к большинству продуктов LNP, используемых в промышленности.

Согласно исследованиям Модерны, следует принимать различные средства для уменьшения образования аддуктов во время производства продуктов LNP на основе мРНК, что может принести множество преимуществ, включая улучшение срока годности, обеспечение высокотемпературного хранения, поддержание активности продукта и обеспечение консистенции от партии к партии.

Moderna утверждает, что трис-буфер может уменьшить образование аддукта, позволяя длительное хранение продуктов мРНК при 2-8 ° С.

Связанные с ними механизмы реакции резюмируются следующим образом:

① Известно, что основания нуклеиновой кислоты реагируют с альдегидами.

② Во фракции LNP третичный азот аминов ионизируемых липидов окисляется с образованием большого количества N-оксидов.

③ В кислом буфере N-оксиды разлагаются, образуя вторичные амины и альдегиды.

④ Альдегиды реагируют с основаниями молекул мРНК (см. ① для механизма реакции), влияя на стабильность молекул мРНК и уровни трансляции белка.

⑤ ТРИС, как поглотитель альдегида, может прореагировать с произведенными альдегидами и уменьшить реакцию между основаниями мРНК и альдегидами.

Стоит отметить, что трис широко используется в качестве поглотителя формальдегида и не ограничивается биомедицинской областью. Так, например, сообщалось, чтоТрометамин трис буферИспользуется в качестве нового средства для удаления альдегида в цементном растворе или латексной краске со следующим механизмом реакции для удаления формальдегида:

TRIS реагирует с формальдегидом в массовом соотношении 1:2. Реакция обратима, и конечным продуктом является оксазолидин.

Из-за важности ионизируемых липидов в структуре и функции LNP, их трудно заменить.За короткое время. Поэтому, чтобы улучшить стабильность молекул мРНК, снизить требования к хранению вакцин мРНК-ЛНП и продлить срок годности, стоит попытаться выбрать буфер TRIS, чтобы он играл роль как регулятора pH, так и поглотителя альдегида.

ООО АВТНовый продукт TRIS (регистрационный номер CDE: F20220000153, регистрация DMF в процессе) с преимуществами производства в условиях GMP, класс для инъекций, низкое содержание эндотоксинов, стабильные поставки на основе локализации, экономичный способ, без ДНазы/РНазы и т. д. Кроме того, AVT предлагает буфер уровня реагента TRIS-HCL. Пожалуйста, не стесняйтесь спрашивать.